多色流式抗体

1.抗体

特异性：抗体的核心，决定了你检测的是什么靶蛋白（如CD3、CD4、CD8、CXCR5等）。通常是单克隆抗体，有明确的克隆号。

宿主来源：主要是小鼠、大鼠、兔等。在设计多色panel时，需避免二抗引起的交叉反应。

形式：完整抗体、F(ab‘)?片段（减少Fc受体非特异性结合）等。

2.荧光素

这是实现“多色"的关键。荧光素受到特定波长的激光激发后，会发射出特定波长的荧光。

仪器配置：必须匹配流式细胞仪的激光器（如488nm蓝、640nm红、355nm紫外等）和检测滤光片。

抗原表达水平：高表达的抗原（如CD45）用较弱荧光素；低表达的抗原（如某些细胞因子、趋化因子受体）用强荧光素（如PE、APC）。

光谱重叠（溢漏）：不同荧光素的发射光谱会有重叠，需要进行荧光补偿。

3.抗体-荧光素偶联物

通过化学方法将荧光素稳定地共价连接到抗体上，形成**终的检测工具。

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